以分子生物学为原理,应用遗传工程和DNA重组技术,利用水稻种子作为生物反应器,在种子中特异性表达各种重组蛋白质和小分子多肽。该平台可解决在其他表达体系表达量低和大规模生产困难的问题,相比其他原核或真核细胞表达平台更加安全,成本更低。
外源基因密码子优化
载体构建
遗传转化
组织培养
植株再生
水稻特异性表达与筛选
规模化种植
选择具有储藏功能的水稻胚乳细胞作为生物反应器,采用胚乳细胞特异性表达的启动子、人工定点突变增强启动子的转录水平、蛋白定向储存、内质网减负和密码子优化等综合技术,使重组蛋白特异性地在水稻胚乳细胞中表达,并定向储存在蛋白体中,获得了较高的重组蛋白的表达,使得重组蛋白产量由mg级别提高到20g级别。
水稻表达体系主要杂质为四种储藏蛋白,而且其中主要的三种为非水溶性蛋白,因此重组蛋白的纯化工艺简单,纯化成本低。
蛋白原料的生产由发酵或细胞培养变为田间种植,不受发酵体积的技术限制,且生产规模的扩大不需要大量固定资产投入用以扩大发酵罐或细胞培养规模以及车间建设,而且稻谷原料可在常温存储2-3 年,在阴凉条件下储藏5 年,储存过程中蛋白质不易降解,随时可以进行规模化提取和纯化生产。
利用基因工程技术生产的植物源重组蛋白不存在传播动物血源性病原体的潜在风险。
水稻原料生产能耗非常低,二氧化碳和污水排放为0。